《女王办公室》是一部港产处境剧，以办公室政治与家庭温情交织为主线。雷小凤（汪明荃 饰）是公司总裁的秘书，掌管公司大小事务，个性强硬果断，人称“女王”。她表面令人敬畏，私下却让同事不服。某日，宣传部来了新任经理缪惜之，雷小凤奉命为其面试秘书。

面试途中，雷小凤结识了单身爸爸施拾壹（杜汶泽 饰）。施拾壹的能力和个性远未达到雷小凤心中的合格线，但缪惜之竟不顾反对，坚持录用他。更令人意外的是，缪惜之的真实身份正是雷小凤失散多年的女儿。母女重逢却未相认，办公室内暗流涌动。

剧集通过雷小凤与缪惜之、施拾壹等人的互动，展现职场权力博弈与亲情纠葛。雷小凤的“女王”作风与缪惜之的独立性格碰撞，施拾壹的草根气息为剧情增添笑料与温情。故事在办公室日常中推进，逐步揭开母女分离的往事，探讨家庭、责任与原谅的主题。