彼得·帕克（托比·马奎尔 饰）是纽约一名平凡的高中生，性格内向，常被同学欺负。一次参观蜘蛛博物馆时，他被一只偷跑出来的变异蜘蛛咬伤，从此身体发生惊人变化：力量增强、反应敏捷、指尖能分泌蛛丝，还拥有了感知危险的“蜘蛛感应”。

起初，彼得只想利用超能力赚钱，参加地下摔跤比赛。然而，他因放过一名劫匪，间接导致心爱的叔叔本遇害。巨大的愧疚让他明白“能力越大，责任越大”。

与此同时，他的好友父亲诺曼·奥斯本因实验失败变成绿魔，在城中制造混乱。彼得穿上自制战衣，化身蜘蛛侠，在爱情、友情与责任之间挣扎，最终与绿魔展开生死对决，踏上守护纽约的英雄之路。